沙门氏菌检验
检测项目
样本处理检测:
- 预增菌处理:孵化时间24±2小时(温度37±1℃),缓冲蛋白胨水(BPW)培养基参照ISO6579
- 均质化处理:均质速度2000rpm±100rpm,样本重量25g±0.1g
- 选择性增菌:RVS肉汤孵化48小时(41.5±0.5℃),检测沙门氏菌生长密度≥10^6CFU/mL
- 二次增菌:MKTTn肉汤培养24小时(37±1℃),pH范围6.8-7.2
- 平板划线:XLD琼脂孵化24小时(37±1℃),典型菌落直径1-2mm,黑色中心特征
- 显色培养基:SMID2琼脂培养24小时(37±1℃),紫色菌落识别率≥98%
- 糖发酵试验:乳糖阴性、蔗糖阳性(参照API20E系统)
- 酶活性测试:赖氨酸脱羧酶阳性、硫化氢产生阳性
- O抗原鉴定:玻片凝集试验,阳性率≥99.5%
- H抗原分型:试管凝集法,覆盖血清型≥2500种
- PCR扩增:invA基因检测(灵敏度≥95%),循环数35±2
- 实时荧光PCR:检测限≤10拷贝/反应,特异性≥99%
- 药敏试验:氨苄西林耐药性判定(抑菌圈直径≤13mm),参照CLSIM100
- MIC测定:最小抑菌浓度值(μg/mL),范围0.25-512
- 毒力基因PCR:spvB、sopB基因阳性率≥90%
- 细胞侵袭试验:HeLa细胞侵袭率≥50%
- MPN计数:最大可能数法,检测下限≤3MPN/g
- 活菌计数:平板计数法,精度±0.5logCFU/mL
- 阳性对照:沙门氏菌ATCC14028株生长阳性
- 阴性对照:无菌样本无生长,交叉污染率≤1%
检测范围
1.肉类及禽制品:包括生鲜鸡肉、牛肉等,重点检测屠宰加工环节的沙门氏菌污染,采样点涵盖表面和内部组织。
2.蛋制品:鲜蛋、液蛋等,检测重点为蛋壳表面和内容物的沙门氏菌侵入,关注肠炎沙门氏菌高发风险。
3.奶制品:原料奶、奶酪等,侧重巴氏杀菌后残留检测,监控pH和温度对细菌存活影响。
4.水样:饮用水、废水等,核心检测沙门氏菌浓度≤1CFU/100mL,重点评估过滤浓缩方法的回收率。
5.环境表面:食品加工设备、工作台面等,通过拭子采样,检测重点为生物膜形成和消毒剂残留影响。
6.饲料:动物饲料原料及成品,监控沙门氏菌污染源,重点检测水分含量≤14%环境下的细菌增殖。
7.即食食品:沙拉、熟食等,检测即食环节的二次污染,核心关注预包装样本的厌氧菌检测。
8.水果蔬菜:鲜切果蔬、预包装产品,侧重灌溉水污染检测,重点评估表面冲洗效率。
9.医疗器械:内窥镜、导管等,检测生物负载,核心监控灭菌后残留沙门氏菌。
10.动物粪便:养殖场样本,重点筛查沙门氏菌携带率,评估交叉污染风险。
检测方法
国际标准:
- ISO6579-1:2017食品和饲料中沙门氏菌检测方法(基于增菌和分离培养)
- ISO/TS6579-2:2017实时PCR法检测沙门氏菌(分子生物学替代方法)
- GB4789.4-2016食品微生物学检验沙门氏菌检验(采用三阶段增菌流程)
- GB/T5750.12-2006生活饮用水标准检验方法微生物指标(包含沙门氏菌MPN法)
检测设备
1.恒温培养箱:MemmertINC108型(温度范围0-70℃,精度±0.1℃,容量200L)
2.生物安全柜:ESCOA2型(风速0.45m/s±0.05m/s,HEPA过滤效率99.99%)
3.PCR扩增仪:Bio-RadT100型(热循环速度5℃/秒,温度均匀性±0.5℃)
4.实时荧光PCR仪:AppliedBiosystems7500型(检测通道6个,灵敏度≤10拷贝)
5.自动微生物鉴定仪:VITEK2Compact型(鉴定速度≤8小时,数据库≥500菌种)
6.显微镜:OlympusCX43型(放大倍数40-1000X,分辨率0.2μm)
7.离心机:Eppendorf5810R型(转速100-15000rpm,容量4×100mL)
8.均质器:BagMixer400型(拍打速度8次/秒,处理量400mL)
9.电泳仪:Bio-RadPowerPacBasic型(电压10-300V,电流400mA)
10.菌落计数器:Scan500型(自动识别精度±1%,计数范围0-5000CFU)
11.厌氧培养罐:OxoidAnaeroGen型(氧气消耗率≤1%in30min,容量2.5L)
12.pH计:MettlerToledoSevenExcellence型(测量范围0-14,精度±0.01)
13.自动移液器:EppendorfResearchplus型(体积范围0.1-1000μL,误差≤1%)
14.光谱仪:用于培养基质量控制,波长范围200-800nm(分辨率1nm)
15.高压灭菌器:SystecVX-150型(温度121℃,压力0.22MPa,灭菌时间≥15min)
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。